| 초록 |
1차년도에 1) SOCS1메틸화의 항암치료예측인자인지에 대한 규명, 2) SOCS1메틸화가 FOLFOX adjuvant의 감수성을 예측하는 인자인지에 대한 연구, 3) SOCS1메틸화를 보이는 대장암의 임상병리학적 특성 규명을 목표로 연구를 시행하였고, 그 결과 1) 1173예의 대장암에 대한 SOCS1메틸화분석후 수술후 보조항암화학 치료시행군에 SOCS1메틸화가 좋은 예후를 예측하는 인자임과, 특히 stage III대장암에서 SOCS1메틸화가 있을 경우 사망하지 않음을 관찰함으로써, 감수성인자로서의 가능성을 확인하였음. 2) FOLFOX adjuvant 치료를 받은 대장암 497예 (stage III와 high-risk stage II로 구성)에서 SOCS1메틸화가 있을 경우, 환자가 사망하지 않음을 관찰하였음. 3) SOCS1메틸화를 보이는 stage III대장암은 SOCS1메틸화가 없는 stage III 대장암에 비해 우측대장에 위치하는 경향, 점액질을 분비하는 경향, serration을 보이는 경향, microsatellite instability의 경향, dirty necrosis를 덜 보이는 경향의 특성을 보였음. Microsatellite instability, KRAS mutation, BRAF mutation과도 밀접한 연관성을 보였음. 2차년도에 1) 대장암 세포주를 대상으로 한 SOCS1 메틸화와 SOCS1 발현억제와의 관계에 대한 연구, 2) SOCS1을 차단하거나 발현하게 한 stable cell line구축을 통해 SOCS1의 종양억제 유전자 기능 증명에 대한 연구를 목표로 시행하였음. 그 결과, 1) 9개의 대장암 세포주를 대상으로 SOCS1 메틸화 분석을 vkdlfh하고, SOCS1의 RNA와 단백질의 발현을 확인하였고, SOCS1이 발현되는 세포주와 억제된 세포주(LoVo, SNU-81, SNU-407)를 이용해 Pharmacological unmasking study (5-aza-deoxycytidine plus trichostatin A)를 하여 메틸화를 풀어졌을 때, SOCSI이 발현되는 것을 확인하였고, 이로써 SOCS1메틸화가 SOCS1발현을 억제한다는 것을 확인하였음. 2) SOCS1-expressing stable cell line (LoVo, SNU-407)을 대상으로 cell proliferation과 invasion assay, MTT assay를 확인하였으나, SOCS1이 발현되는 세포주와 대조군사이의 유의한 차이를 확인할 수 없었음. 3차년도에는 1) adjuvant FOLFOX 코호트에서 SOCS1메틸화가 예후인자인지에 대한 밸리데이션연구를 시행하고, 2) nude mouse실험을 통해 SOCS1의 발현이 종양성장에 억제인자로 작용하는지에 대해 확인하는 연구를 시행하고자 하였고, 3) 2차년도의 연구를 거듭하여 같은 결과가 나오는지를 확인하고자 하였음. 그 결과, 1) adjuvant FOLFOX 코호트에선 SOCS1메틸화가 예후적 의미가 없음을 재확인하였고, 2) nude mouse실험에서 SOCS1을 전달감염시킨 세포주는 SOCS1이 발현안되는 짝지은 세포주에 비해 종양성장이 덜하거나 멈추는 것을 볼 수 있었음. Nude mouse의 실험결과를 in vitro에서 다시 재현한 결과 nude mosue의 결과와는 조금 다르게 나타나는 것을 확인하였음. Nude mouse에서 SOCS1을 전달감염발현시킨 LoVo세포주는 그렇지 않은 LoVo세포주에 비해 덜 자라는 경향을 보였고, SOCS1을 전달감염발현시킨 SNU-407세포주는 종양이 형성되지 않았으나, 그렇지 않은 SNU-407세포주는 nude mouse에서 잘 자랐음. 그러나, in vitro assay에서는 SOCS1이 발현되는 LoVo세포주는 SOCS1이 발현 안되는 LoVo세포주에 비해 세포수의 증가가 적었지만, SNU-407의 경우, SOCS1발현유무에 따른 세포수 증가에 차이가 없었다. 이를 통해, in vivo assay와 in vitro assay가 반드시 일치하지 않음을 확인하였음. SOCS1은 mouse xenograft에서 종양억제유전자로서 기능함을 확인하였음. 3년의 연구수행을 통해 SOCS1은 대장암에서 DNA메틸화로 인해 불활성화되는 종양억제유전자이며, SOCS1메틸화는 독특한 임상병리학적 특성을 가진 대장암 아군을 선별하는 바이오마커로서의 가치가 드러나, 추가적인 연구를 통해 밸리데이션되어야 할 것임. (출처 : 연구결과 요약문 4p) |
