| 초록 |
□ 연구개요 포유동물을 대상으로 하여 난자의 퀄리티에 따른 유전적 차이를 분석한 후 이러한 유전자에 대한 검증을 통해, 궁극적으로는 인간 배아에 적용하여 보조생식술의 효율성을 증가시키는 가시적 기술을 개발할 뿐만 아니라 생식생명공학 기술 발달을 기반으로 인간의 불임율을 낮추는 것임. □ 연구 목표대비 연구결과 1. 불임 및 난임 관련 유전자 정보 검색 및 유전자 후보군 선정 난자 수집 후 난자 퀄리티에 따라 구분하여 체외성숙을 실시한 후, microarray 등의 방법을 이용하여 난자 퀄리티에 따른 전사체 구성의 차이를 찾아 이와 관련된 유전자 후보군을 선정함. 2. 후보군 유전자의 기능 규명 siRNA 및 inhibitor 등을 통해 특정 유전자를 knockdown 시키거나, 반대로 overexpression 및 후보 유전자 관련 단백질을 첨가하여 체외성숙 및 체외배양하여 난할율, 배반포율, TE/ICM세포 비율 등을 분석함. 또한 Real-time PCR과 western blot analysis를 이용하여 embryonic genome activation과 관련된 유전자 발현 및 단백질 발현 수준의 변화 양상을 분석하여 이들 후보 유전자의 기능을 규명한다. 더불어 cDNA chip을 이용하여 대조군과 실험군간의 유전자 발현 양상을 비교 분석함. 3. 후보군 유전자의 분자적 기전 규명 체외성숙난 및 배아를 대상으로 단백질-DNA간의 상호작용을 알아보고자 ChlP analysis을수행하고, 이와 관련된 프로모터의 bisulfite sequencing을 통해 CpG메틸화 정도를 분석함으로써 후생유전학적 조절과의 연관성도 알아봄. □ 연구개발결과의 중요성 난자 품질 개선과 관련된 유전자 및 단백질을 발견하고 이들의 기능 및 분자적 기전을 규명함으로써 난자 품질, 난자 성숙 및 배아의 발생과 착상에 대한 기초적인 이해의 폭을 확대할 수 있음. 또한 이와 관련된 원천 기술을 확보함으로써 국가적으로 생식생명공학 경쟁력 향상과 지적 재산권을 행사할 수 있음. 또한 난자 품질 저하를 극복하게 될 발판을 마련함으로써 추후 임상 적용시 산모의 연령 증가 및 기타 이유로 인한 난자 품질 저하가 원인인 불임 및 난임 환자들의 임신성공 및 출산율을 높임으로써 국가적 위기인 저출산 문제 해결과 이와 관련된 사회적 비용 절감에 기여할 수 있게 됨. 아울러 과제 수행을 통해 추가로 밝혀진 유전자 및 연관 유전자의 메커니즘에 대한 추가 연구 가능성을 제공을 통한 생식생명공학기술의 추가 성장 동력으로 삼을 수 있음. (출처 : 연구결과 요약문 2p) |
